Há pouco menos de 100 anos, em 1922, um americano, o
professor Lewis Knudson, descobriu uma forma artificial de promover a
germinação das minúsculas sementes das orquídeas. Assim nascia a semeadura em
meio assimbiótico.
Até então na natureza as sementes das orquídeas
precisavam de uma relação simbiótica com um fungo de nome micorrizo para
poderem germinar.
Ainda hoje a grande maioria dos orquidófilos não domina, mas conhece esta cobiçada técnica, por causa dos investimentos em equipamentos para
realizá-la, embora muita gente já tenha construído sobre ela.
Nesta publicação eu detalho o procedimento que desenvolvi
(construído sobre os métodos e procedimentos já conhecidos) na intenção de facilitar ao
máximo a semeadura em casa e que se mostrou muito simples de ser executado utilizando
equipamentos de fácil aquisição a um custo muito pequeno. Eu ia batizá-lo com o
nome de “Super Método Facilitado para Semeadura de Orquídeas em Meio
Assimbiótico com Seringa e Agulha de Grosso Calibre em Ambiente Não Controlado”,
mas esse nome me pareceu um pouco grande, então decidi chama-lo simplesmente de
“Método JRG” para Semeadura in Vitro, ...Mas na verdade acho que o nome não faz
a menor diferença. rs
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Método JRG para Semeadura in Vitro de Orquídeas
O Método JRG foi desenvolvido para que qualquer pessoa
dedicada e cuidadosa, além de amante de orquídeas, possa fazer a semeadura de
suas próprias plantas.
Tudo começou assim. Certa noite ao abrir uma lata de massa de tomates retirando o lacre sobre a tampa e observando o ar entrar liberando-a foi que tive a luz sobre o detalhe que faz desse método bastante seguro em relação a contaminações. A tampa tinha um furo e pensei, de alguma forma, na operação inversa para realizar a semeadura com uma agulha bem grossa. Isso tudo aconteceu no início de 2010. A primeira semeadura foi um fracasso e isso de deveu a ineficaz desinfecção das sementes, mas serviu como aprendizado. As semeaduras posteriores foram todas bem sucedidas até o momento.
Tudo começou assim. Certa noite ao abrir uma lata de massa de tomates retirando o lacre sobre a tampa e observando o ar entrar liberando-a foi que tive a luz sobre o detalhe que faz desse método bastante seguro em relação a contaminações. A tampa tinha um furo e pensei, de alguma forma, na operação inversa para realizar a semeadura com uma agulha bem grossa. Isso tudo aconteceu no início de 2010. A primeira semeadura foi um fracasso e isso de deveu a ineficaz desinfecção das sementes, mas serviu como aprendizado. As semeaduras posteriores foram todas bem sucedidas até o momento.
O que você precisa providenciar para iniciar o trabalho:
- cápsula de sementes ou sementes a serem semeadas já
retiradas da cápsula sobre um papel toalha ou recipiente desinfetado com álcool
- 1 seringa descartável de 10ml
- 1 agulha hipodérmica de 1,2mm ou mais espessa
- 1 bastão de cola quente
- vidro furado e selado com o meio de cultura pronto (Este é o diferencial deste método. A tampa do vidro deve ser furada num diâmetro que permita a introdução da agulha grossa)
- algodão
- álcool 92
- 2 copos (aproximadamente) de água para ser fervida em
recipiente para ir ao fogo com tampa. Depois de fervida por 10 minutos a água deverá ser resfriada no próprio recipiente sem que seja aberto de forma alguma.
- 1 copo de água filtrada onde será adicionado o hipoclorito de sódio
- copo graduado em ml
- água sanitária - hipoclorito de sódio – importante ser de ótima qualidade
- papel toalha
Escolha um local confortável e limpo. Eu desinfeto toda a bancada e os materiais com álcool.
A sugestão é que se faça sobre a pia da cozinha próximo
ao fogão.
É importante não haver movimento de ar.
- ferva a água no recipiente com a tampa durante 10
minutos e aguarde esfriar sem abrir
- desinfete com álcool a bancada (pia ou mesa). Se necessário
use toalha de papel, não de pano.
- desinfete com álcool as mãos
- desinfete com álcool as seringas dentro e fora com as
agulhas
- umedeça com álcool 1 chumaço de algodão e deposite-o
sobre o furo selado da tampa do vidro de cultura
- adicione 20ml de água sanitária no copo graduado e
complete até 100ml com a água filtrada
- retire o êmbolo da seringa, molhe a borracha na solução
de água sanitária e use-a para aderir às sementes.
- recoloque o êmbolo na seringa agora contendo as
sementes e retire o ar até 1ml
- aspire a solução de água sanitária aproximadamente até
6ml e mais 2ml de ar
- durante 10 minutos agite a seringa suavemente mantendo
o movimento das sementes na solução
- descanse a seringa com a agulha voltada para cima até
que parte das sementes decante e a outra parte boie
- suavemente e sem balançar a seringa pressione o êmbolo
com a agulha voltada para cima eliminando a solução com as sementes que boiaram
(quase sempre são estéreis). Elimine toda água possível tomando cuidado para não eliminar as
sementes que afundaram.
- desinfete a agulha com o algodão embebido em álcool
- agora abra a tampa do recipiente com água fervida e já
fria e aspire a água para lavar as sementes até 6ml aproximadamente
- agite por 5 minutos ou mais
- descanse a seringa com a agulha voltada para cima e
aguarde que as sementes decantem novamente
- elimine do mesmo modo anterior a água, deixando 1ml com
as sementes
- desinfete a agulha com o algodão embebido em álcool que
está sobre o vidro
- agite levemente a seringa para misturar as sementes a
água (isso é importante para que o conteúdo todo seja transferido para o vidro)
- passe o algodão sobre o lacre do vidro e perfure-o com
a agulha, injetando as sementes. (Comigo já aconteceu duas vezes de entupir a agulha no momento de furar a cola, mas isso pode ser resolvido girando a agulha ao furar a cola)
Nesse momento pode acontecer do vidro estar com baixa pressão
e sugar as sementes voluntariamente
Casso contrário injete-as, mas não retire a agulha.
- agora pressione o algodão para deixá-lo o mais seco
possível e coloque-o protegendo a agulha e o lacre pois o ar poderá entrar e
assim passará pelo algodão sendo filtrado sem que aspire álcool junto.
-retire a agulha deixando o algodão sobre o orifício
deixado pela agulha
- acenda a chama do fogão e aqueça a cola quente até
derretê-la
- rapidamente retire o algodão e sele o orifício da tampa
-lacre em volta da tampa com um filme de pvc, desses
utilizados em cozinha para selar alimentos. Isso dificultará a instalação e
desenvolvimento de esporos de fungos no entorno da tampa, que poderão entrar no
vidro. (Melhor já fazer isso antes da semeadura quando preparar o meio de cultura)
-sua semeadura está finalizada
- coloque os vidros em um local bem iluminado evitando a
incidência direta de sol, por exemplo, uma janela.
Depois de algumas semanas as sementes deverão começar a
ganhar a cor verde, o que significa que a semeadura deu certo e alguns meses
depois o resultado será esse.
Quando retirar as plantas dos vidros e não tiver lugar pra colocar tanta planta pode mandar umas pra mim. rsrs